宫颈ctc检查是指对宫颈部位进行的ctc检查,主要史为了确定宫颈内有没有肿瘤细胞的。ctc检查的在临床医学中应用是比较广泛的,尤其是在肿瘤科中,更是一种十分必要的检查手段。ctc检查有着多种不同的方法以及检测方式。下面,本文将对于宫颈ctc检查的具体项目以及监测的方法进行比较详尽的。
一、CTC检测是什么?
CTC是CirculatingTumorCell的缩写,意思是循环肿瘤细胞,是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称。CTC检测通过捕捉检测外周血中痕量存在的CTC,监测CTC类型和数量变化的趋势,以便实时监测肿瘤动态、评估治疗效果,实现实时个体治疗。
二、CTC检测的方法
CTC检测由于只需抽取5-10毫升血液,检测方便、无创、没有明显副作用,被看作“液体活检”。CTC检测是一种非侵入性的新型诊断工具,通过对外周血循环系统中的肿瘤细胞进行精确的计数以及分型,为肿瘤患者的预后判断、疗效评价以及个体化治疗提供重要的指导作用。其中美吉生物推出的循环肿瘤细胞分离与分型技术处于国际领先水平,为肿瘤无创实时监测和实时个体化治疗提供了技术保障。
三、CTC检测的具体方式
常用的CTC检测技术如免疫荧光、PCR、FISH及高通量测序等。
1、免疫荧光法(IF)实体肿瘤细胞一般均为上皮来源,细胞内会表达角蛋(cytokeratin,CK)或其他肿瘤标示物(如HER2)。借助免疫荧光染色,可对来自实体瘤CTC中的瘤标进行识别,从而达到检测CTC的目的。这也是目前检测CTC的最常见方法。缺点是,在CTC形成过程的间质化(EMT)阶段,大量的CK会降解,从而在CTC检测过程中出现因―看不见‖而造成的假阴性。
2、荧光原位杂交(FISH)荧光原位杂交,是根据已知细胞内特异的DNA序列,以利用荧光标记的特异寡聚核苷酸片段作为探针,与细胞内的基因组中DNA分子杂交,检测该特异基因序列的存在与丰度。FISH技术与CTC结合,不仅可以检测CTC表面标志物,也可以检测CTC细胞内部的标志物及核型等。
3、RT-PCR反转录PCR。提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用引物和逆转录酶将mRNA反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。结合RT-PCR可同时对若干个基因的表达进行检测。位点特异性PCR技术可用于检测CTC携带的驱动基因的突变情况。
4、二代测序CTC数量少,直接进行二代测序难度大。需要将单细胞的DNA扩增后,再利用二代测序检查基因序列。比较有代表性的是多重退火和成环循环扩增技术和多重臵换扩增(MDA)。但是,目前单细胞测序的技术仅仅停留在实验室阶段,未来向市场推广还有很长的路要走。而且由于肿瘤细胞的异质性,单细胞测序是否有代表性还需要更多的科学研究来证明。